全自動熒光細胞分析儀是一款基于圖像法檢測，配合多熒光通道，通過采集圖像中的細胞信息，進行定量分析。它將熒光顯微成像與統(tǒng)計學群體分析結(jié)合于一身，既能提供細胞群的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，又可以獲得單個細胞的圖像，從而提供細胞形態(tài)學信息。*的圖像采集系統(tǒng)同時產(chǎn)生明場以及四張熒光圖像，讓實驗結(jié)果更為直觀。
全自動熒光細胞分析儀的應(yīng)用舉例：
(一).在脂肪干細胞研究中的應(yīng)用
1.細胞濃度、活率計數(shù)
全自動熒光細胞分析儀可同時進行臺盼藍及AOPI兩種方法計數(shù)，確保不同狀態(tài)的脂肪干細胞計數(shù)結(jié)果準確性。對于狀態(tài)差的樣本，臺盼藍計數(shù)的細胞圖片中，出現(xiàn)許多臺盼藍染色非常淺的類似空泡狀的細胞，這些細胞對樣本死活的判斷常常會比較主觀、容易誤判。
AOPI方法可以很好解決這個問題。所以建議對于不同狀態(tài)的的樣本可根據(jù)需求采用兩種方法計數(shù)結(jié)果正準確。
2.脂肪干細胞細胞表型鑒定
細胞密度、生長代數(shù)10代以內(nèi)生物學特性基本保持不變，3代以上細胞表型標志物表達量下降，所以脂肪干細胞表型鑒定是非常重要的。主要包括細胞形態(tài)及CD分子標志物的鑒定。
對于脂肪干細胞表型鑒定，全自動熒光細胞分析儀不僅可以為大家提供清晰可靠的細胞圖片，同時可以結(jié)合FCSexpress類流式分析軟件得到可靠的類流式數(shù)據(jù)分析，從而滿足大家的需求。
(二).在免疫治療領(lǐng)域的應(yīng)用
免疫療法，如CAR-T治療包括從病人收集外周血單核細胞(PBMC)，然后分離所需的T細胞亞群，通過基因改造產(chǎn)生工程CAR-T細胞，CAR-T細胞在體外大規(guī)模擴增后再回輸?shù)交颊?。全自動熒光細胞分析儀系統(tǒng)可以對整個CAR-T生產(chǎn)過程中細胞濃度，活率進行監(jiān)測，并且符合GMP的要求。
1.AO/PI雙熒光法檢測活率：
吖啶橙和碘化丙啶是可以和細胞核核酸結(jié)合的熒光染料。AO可以穿透活細胞和死細胞對細胞核進行染色并發(fā)出綠色熒光，PI進入死細胞對細胞和進行染色并發(fā)出紅色熒光。
因此AO/PI為細胞核染料，可以準確區(qū)分活細胞與死細胞，而且可以排除雜質(zhì)或者非特異細胞的干擾，進行精準的濃度活率檢測。
2.細胞毒性檢測
對靶標細胞用無毒的無放射性的鈣黃綠素進行標記(或者GFP轉(zhuǎn)染標記)，我們可以觀察CAR-T細胞對腫瘤細胞殺傷效應(yīng)。活的腫瘤細胞會含有鈣黃綠素或者GFP，死的腫瘤細胞不含有鈣黃綠素或者GFP。
Hoechst33342被用來染色所有的細胞(包含T細胞和腫瘤細胞)，PI用來染色所有的死細胞(包含T細胞和腫瘤細胞)。這種染色策略可以讓我們對細胞進行精準的區(qū)分。
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